BAC亚克隆工具包
手册[PDF] 联系技术支持 订单 序列
特点
无需限制性位点
最多可亚克隆20kb片段
高效Red/ET
Red/ET重组蛋白表达质粒pRedET在重组完成后易于消除
从BAC亚克隆基因的策略综述
1. PCR及转化
在PCR反应中,构筑有带侧面同源臂的线性极小载体。在使用Red/ET表达质粒转化大肠杆菌BAC宿主后,引入重组必需的基因表达。
2.重组
下一步,线性载体(添加同源臂的PCR产品)电穿孔至细胞中。进行Red/ET介导重组。
2. 选择
携带亚克隆片段的克隆由氨苄青霉素抗性选择识别。
目录
Red/ET重组蛋白表达质粒pRedET。通过该质粒转化,任意大肠杆菌株都可作为Red/ET专用
用于亚克隆实验的携带ColE 1复制起点及氨苄青霉素抗性基因的线性载体
阳性对照,用于从对照BAC亚克隆15kb片段至工具包提供的载体。
详细操作指南,质粒、遗传图、序列的说明。
序列
ColE1-amp minimal vector
ColE1-amp极小载体